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7-29
固相萃取就是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附,與樣品的基體和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附,達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。固相萃取具有如下優(yōu)點(diǎn):(1)高的回收率和高的富集倍數(shù)。大多數(shù)固相萃取體系的回收率較高,可達(dá)70%~100%;另外,固相萃取的富集倍數(shù)一般很高,很多體系很容易就能達(dá)到幾百倍,少數(shù)體系甚至能達(dá)到幾千或幾萬倍,這是一般傳統(tǒng)分離富集方法很難達(dá)到的。(2)使用的高純有毒有機(jī)溶劑量很少,減少了對(duì)環(huán)境的污染,是一種對(duì)環(huán)境友好的分離富集方法;另...
7-23
賽默飛色譜柱選擇時(shí)要掌握色譜柱的主要關(guān)鍵參數(shù),色譜柱的保護(hù),色譜分析理論以及色譜柱的分類等知識(shí),分析工作者才能做到在工作開展時(shí)一針見血的選擇色譜柱,有的放失的開發(fā)方法,后心中有數(shù)的完成分析工作。賽默飛色譜柱的關(guān)鍵參數(shù)有固定相、內(nèi)徑,長(zhǎng)度和液膜的厚度。1)固定相固定相由固體吸附劑或涂有固定液的擔(dān)體構(gòu)成。擔(dān)體是一種多孔性化學(xué)惰性固體,用來支撐固定液。擔(dān)體的特性是表面積大、有化學(xué)惰性、熱穩(wěn)定性,孔隙結(jié)構(gòu)和浸潤(rùn)性。擔(dān)體分為一般分硅藻土和非硅藻土兩大類。固定相一般是具有活性的多孔性固體...
7-14
在高效液相色譜分析系統(tǒng)中,對(duì)溫度控制的要求越來越高,藥典及諸多新的分析方法,也對(duì)柱溫給出條件,由于恒溫箱可以精確、穩(wěn)定的控制使用溫度,對(duì)于提高柱效。使Acclaim色譜柱成為高效液相色譜儀的重要配套裝置。以高純度具有良好穩(wěn)定性的硅膠為基質(zhì),通過嚴(yán)格控制單分子層形成以及封尾的化學(xué)反應(yīng)條件,可確保柱與柱之間有著可靠的重現(xiàn)性。該填料為均一的球形顆粒,通過運(yùn)用的勻漿裝填技術(shù)裝填得到的色譜柱,柱床密度均一穩(wěn)定,可保證具有的柱效。Acclaim色譜柱使用的三個(gè)使用要點(diǎn):1.Acclaim...
6-29
免疫親和柱是利用抗原抗體特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原抗體的高選擇性,從復(fù)雜的待測(cè)樣品中提取目標(biāo)化合物。免疫親和層析常見的用途是純化重組蛋白。免疫親和層析是從粗混合物中純化蛋白質(zhì)或核酸理想選擇。如果蛋白質(zhì)的分子量,疏水性,電荷等未知,親和色譜法仍可適用于這種情況。一個(gè)典型例子是嘗試分離具有特定活性的酶時(shí),可以用與所選底物相似或相同的連接配體構(gòu)建親和柱。免疫親和柱的使用要點(diǎn):1、上柱的樣品溶液應(yīng)該保持酸堿中性、無懸浮物、甲醇濃度不宜過高;2、若樣品為復(fù)雜樣品,例如高蛋...
6-22
選擇合適的島津色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時(shí)間,并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場(chǎng)上色譜柱種類繁多,不同類型的色譜柱分離對(duì)象不同,因此,要做合適的選擇,必須對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。因?yàn)閸u津色譜柱是消耗品,隨著使用時(shí)間或進(jìn)樣次數(shù)的增加,會(huì)出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰的現(xiàn)象,一般來說可能是柱效下降。淺析影響島津色譜柱使用壽命的因素:1.流動(dòng)相pH不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。常溫下無定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg·L-1,且在pH1~9的范圍內(nèi)溶解的硅膠量...
6-12
MonoTower色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護(hù)色譜柱。MonoTower色譜柱利用先將混合物分離,然后利用檢測(cè)器依次檢測(cè)已分離出來的組分。色譜柱的直徑為數(shù)毫米,其中填充有固體吸附劑或液體溶劑,所填充的吸附劑或溶劑稱為固定相。與固定相相對(duì)應(yīng)的還有一個(gè)流動(dòng)相。流動(dòng)相是一種與樣品和固定相都不發(fā)生反應(yīng)的氣體,一般為氮或氫氣。待分析的樣品在色譜柱頂端注入流動(dòng)相,流動(dòng)相帶著樣品進(jìn)入色譜柱,故流動(dòng)相又...
5-28
氣相色譜柱做為氣相色譜儀的核心,是做實(shí)驗(yàn)分析常用的色譜耗材,除用于定量和定性分析外,還能測(cè)定樣品在固定相上的分配系數(shù)、活度系數(shù)、分子量和比表面積等物理化學(xué)常數(shù)。氣相色譜柱應(yīng)該如何選擇適合的膜厚度?膜的厚度對(duì)所分析化合物的溶解性有比較大影響,因此,正確選擇膜的厚度與正確選擇柱長(zhǎng)同樣重要。相比率是表示色譜柱固定相多少的一種方式,相比率是指毛細(xì)管柱的內(nèi)部體積與固定相的體積比。相比率(β)用公式可表示為:β=D/4μf式中:D=柱內(nèi)徑(微米)μf=固定相厚度較高的相比率色譜柱內(nèi)固定相...
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